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碘[125I]睪酮
放射免疫分析藥盒說明書
【藥品名稱】
通用名：碘[125I]睪酮放射免疫分析藥盒
英文名：Iodine[125I] Testosterone Radioimmunoassay Kit
漢語拼音：Dian [125I] Gaotong Fangshemianyifenxi Yaohe
【成分】
| 規(guī)格 成分 | 100管 | 制品狀態(tài) |
| 1）T標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5） | 6瓶(S0:1ml, 其它0.5ml/瓶) | 液 體 |
| 2) T質(zhì)控血清 | 2瓶(0.5ml/瓶) | 液 體 |
| 3）125I-T（紅色） | 1瓶(10ml) | 液 體 |
| 4）兔抗-T抗體（藍(lán)色） | 1瓶(10ml) | 液 體 |
| 5) 驢抗兔免疫分離劑 | 1瓶(50ml) | 液 體 |
【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)呈疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無沉淀或絮狀物。
【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I]，其物理半衰期(T1/2)為60天。
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【意義】
睪酮（testosterone, T）是一種19碳甾體激素，分子量288D，男性主要由睪wan間隙細(xì)胞分泌，少量來自腎上腺皮質(zhì)；女性主要由腎上腺網(wǎng)狀帶分泌。睪酮是雄性激素中活性強(qiáng)的一種激素，其主要生理作用系維持男性第二性征和正常性腺功能，以及促進(jìn)蛋白質(zhì)合成代謝等。
本藥盒主要用于血清中睪酮含量的測定，對男性性早熟、男性性功能低下、陽萎、睪wan發(fā)育不全、睪wan細(xì)胞瘤、女性特發(fā)性多毛癥以及Cushing氏綜合征等內(nèi)分泌疾病的診斷均有重要意義。
血清T增高常見于：睪wan良性間質(zhì)細(xì)胞瘤、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、真性性早熟癥、皮質(zhì)醇增多癥、女性男性化腫瘤、女性特發(fā)性多毛癥、多囊卵巢綜合癥、注射睪酮或促性腺激素、肥胖以及中晚期孕婦等。
血清T降低常見于：男性性功能低下、原發(fā)性睪wan發(fā)育不全性幼稚、垂體功能減退、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（陽性率約50%）、陽萎、骨質(zhì)疏松癥、垂體性矮小癥、甲狀腺功能減低、高PRL血癥、部分男性乳房發(fā)育、外傷后性功能減退、隱睪炎等。
【測定原理】
本藥盒采用競爭放射免疫分析法，即標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中的T和125I-T共同與*的特異性睪酮抗體在適宜的條件下進(jìn)行競爭性結(jié)合反應(yīng)。一部分125I-T與抗體結(jié)合形成復(fù)合物，而另一部分呈游離狀態(tài)。125I-T與抗體結(jié)合的比例取決于標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中非標(biāo)記T的含量，非標(biāo)記T的含量越高，125I-T與抗體形成復(fù)合物越少；非標(biāo)記T的含量越低，125I-T與抗體形成復(fù)合物越多。抗原-抗體復(fù)合物用免疫分離劑沉淀下來，測定沉淀物的放射性計數(shù)。經(jīng)過適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測樣品的睪酮含量（數(shù)據(jù)可由計算機(jī)自動處理）。
【適用儀器】適用于各類ν-放射免疫分析儀。
【樣本要求】
取靜脈血分離血清，待測；如不立即測量，可將樣品密封后，置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y，2~8℃保存不應(yīng)超過1周，-20℃保存不超過2個月。冰凍樣品在保存過程中應(yīng)避免反復(fù)凍融。冰凍樣品測定前，將樣品置于室溫或常溫水中融化，并充分搖勻!
【用法用量】
1 試劑配制、使用方法和保存
.1 T標(biāo)準(zhǔn)品：淡黃色液體，直接使用。濃度依次為：0、0.1、0.5、2、8、20ng/ml，2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定；-20℃冷凍保存，標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2測定步驟
取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S0-S5和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑?。┌ù郎y樣品要搖勻，并且平衡到室溫。
加樣順序表： 單位：μl
| 管 別 試 劑 | 總T管 | NSB管 | S0管 | S1~5管 | 樣品管 及質(zhì)控管 |
| 蒸餾水 | ― | 100 | ― | ― | ― |
| T標(biāo)準(zhǔn)品S0 | ― | 50 | 50 | ― | ― |
| T標(biāo)準(zhǔn)品S1~5 | ― | ― | ― | 50 | ― |
| 待測樣品或質(zhì)控 | ― | ― | ― | ― | 50 |
| 125I-T | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 兔抗-T抗體 | ― | ― | 100 | 100 | 100 |
| 充分搖勻，37℃水浴1小時 | |||||
| 驢抗兔免疫分離劑 | ― | 500 | 500 | 500 | 500 |
| 充分搖勻，室溫放置15分鐘，3500轉(zhuǎn)/分離心15分鐘，吸棄上清液，在γ計數(shù)器上測定各沉淀管的放射性計數(shù)。 | |||||
3數(shù)據(jù)處理
3.2.2 logit計算：各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計算公式為logit=ln[(B/ B0)/(1－B/ B0)]
3.2.3 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時是一條直線）。根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。
3.2.4計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。
3.3 尿液中睪酮的測定方法及數(shù)據(jù)處理
3.3.1收集24小時尿，量總體積，混勻后取尿液0.2ml，加 0.25N鹽酸0.8ml，于30℃水浴水解20~24小時，以此水解尿作為測定樣品。
3.3.2取水解尿樣品25μl，加到樣品管中，用緩沖液（此緩沖液為睪酮水解尿）補(bǔ)到50ul即加25ul測尿緩沖液。該緩沖液為0.24M Triss溶液，其作用是將強(qiáng)酸性的水解尿樣品調(diào)整為接近中性，否則會使測定值嚴(yán)重失真（偏高）！，
3.3.3 24小時睪酮尿含量的計算：
尿液濃度= A·V1/V2·50/V3 ng/ml=10A ng/ml
24小時尿中睪酮總量=A·V1/V2·50/V3·Dng=0.01A·Dμg
其中： A—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得睪酮的濃度（ng/ml）
V1——水解尿的總體積（1ml）
V2——被水解的尿體積（0.2ml）
V3——水解尿加入的體積（25μl）
50為加入測量管中水解尿與緩沖液的總體積
D—24小時總尿量（ml）
例如：某正常人24小時總尿量為2000ml，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出濃度為3.8ng/ml，則：
尿液濃度=10×3.8ng/ml=38ng/ml。
24小時尿中睪酮總量=0.01×3.8×2000μg =78μg。
3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實(shí)際計算）。濃度單位ng/ml
| 項(xiàng)目 | NSB | 0 | 0.1 | 0.5 | 2 | 8 | 20 |
| 百分結(jié)合率(%) | B/T | B/B0 | |||||
| 2.7 | 76.9 | 81.3 | 54.5 | 31 | 12.8 | 7.3 | |
| Log-logit主要曲線參數(shù) | A=0.30 B=-1.75 R=-0.9997 | ||||||
| ED75=0.16 ED50=0.67 ED25=2.86 | |||||||
【參考正常值】
下列所提供的數(shù)據(jù)僅供參考，每個實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的條件及接觸的人群建立自己實(shí)驗(yàn)室睪酮的正常值范圍。
1．人血清睪酮參考正常值： （單位：ng/ml）
| 性 別 | 年 齡(歲) | 平 均 值 | 范 圍 |
| 男性成人 | 15~69 | 5.75 | 3.2~14.6 |
| 女性成人 | 15~74 | 0.48 | 0.05~1.2 |
| 男性青春期前 | 2~10 | 0.13 | 0~0.5 |
| 女性青春期前 | 2~10 | 0.12 | 0~0.48 |
成年男性：47~117μg/24小時尿；
成年女性：0.5~12μg/24小時尿。
成年男性：0.15~0.25ng/ml；
成年女性：卵泡期0.08~0.13ng/ml，排卵期0.24~32ng/ml，黃體期0.11~0.15ng/ml。
單位換算：1 ng/ml =100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=3.46nmol/l
由于地區(qū)及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
雙氫睪酮 1.1×10-2% 雌二醇 2.1×10-2%
雌 三 醇 2×10-15% 孕 酮 3.2×10-2%
雄烯二酮 1.2×10-5%
5．使用期限：見產(chǎn)品外包裝。
【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項(xiàng)】
【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用，孕婦及哺乳期婦女不需接觸本品，所以對其健康無損害。
【兒童用藥】由于本品僅供體外診斷用，兒童不需接觸本品，所以對其健康無損害。
【貯藏】2～8℃保存。
【有效期】1個月。
【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》，國家藥典委員會 編 2005年5月，WS1-(R-41)-2004Z。
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